產(chǎn)品介紹

該TopoisomeraseI來(lái)源于牛痘病毒（vacciniavirus），通過(guò)基因重組方案制備純化。其能解旋DNA的超螺旋結(jié)構(gòu)，除此外其能識(shí)別并切割雙鏈DNA末端[5’C(T)CCTT↓]，并且與DNA形成共價(jià)連接形成穩(wěn)定復(fù)合物。該共價(jià)復(fù)合物遇到DNA的5’-OH基團(tuán)后，重新連接形成完整DNA鏈。因此，使用該酶可作為DNA的連接有效工具。其可用于DNA的載體連接、缺刻修復(fù)、接頭連接等實(shí)驗(yàn)。

應(yīng)用

1.DNA-載體連接

2.缺刻修復(fù)

3.接頭連接

注意事項(xiàng)

（1）1×vacciniaTOPOIBuffer：50mMTris-acetate(pH7.5),

100mMNaCl,2.5mMMgCl2。

（2）該酶的最佳反應(yīng)溫度為37°C。80°C20min可使該酶

失活。

（3）該酶切割偶聯(lián)試驗(yàn)時(shí)，識(shí)別位點(diǎn)[5’C(T)CCTT↓]的3’

端堿基數(shù)量影響偶聯(lián)效率。

（4）共價(jià)復(fù)合物進(jìn)行DNA分子連接時(shí)，底物5’-端需要保

留-OH基團(tuán)。

牛痘病毒-拓?fù)洚悩?gòu)酶(TopoisomeraseI)

牛痘病毒-拓?fù)洚悩?gòu)酶(TopoisomeraseI)