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細胞培養(yǎng) 中出現(xiàn)黑點是污染嗎?如何處理?
2025-08-05 一旦您在細胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點生成，首先，要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁，然后，在鏡下觀察培養(yǎng)細胞生長的狀態(tài)，黑點是否游動。如果細胞被污染，微生物則會大量繁殖，培養(yǎng)基就會迅速變黃、變混濁。污染包括細菌污染、支原體污染等。如果在鏡下觀察細胞，生長狀態(tài)良好，與黑點出現(xiàn)前相比，沒有任何變化，那么，黑點的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān)：(1)細胞生長過老，破碎的細胞殘骸;(2)血清質(zhì)量不好，反復凍融的結(jié)果;(3)配制培養(yǎng)基的pH值偏高，不宜細胞生長;(4)配制培養(yǎng)基的水質(zhì)、容器不合格?？蓱?yīng)...
胎牛血清使用中的常見問題（二）
2025-08-05 4、培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素后，可長期保存嗎?一旦您在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時，您應(yīng)該在兩到三周內(nèi)使用它。因為一些抗生素和血清中的基本成分在解凍后就開始降解。5、為什么要熱滅活血清?加熱可以滅活補體系統(tǒng)。激活的補體參與溶解細胞事件，刺激平滑肌收縮，細胞和血小板釋放組胺，激活淋巴細胞和巨噬細胞。在免疫學研究，培養(yǎng)ES細胞、平滑肌細胞時，推薦使用熱滅活血清。6、有必要做熱滅活嗎?實驗顯示，經(jīng)過正確處理的熱滅活血清，對大多數(shù)的細胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對細胞的生...
如何避免胎牛血清中產(chǎn)生沉淀?
2025-08-05 按如下操作可避免沉淀的產(chǎn)生：(1)解凍血清時，請隨時將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生。(2)血清分裝凍存時，須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一。(3)勿直接由-20℃直接至37℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。(4)勿將血清置于37℃太久，否則血清會變得渾濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會因此受到破壞，從而影響血清的品質(zhì)。(5)血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無須做此步驟。(6)若必須做血清的熱滅活，請遵...
胎牛血清使用中的常見問題（一）
2025-08-05 1、如何儲存和解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融。但必須注意的是，融解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻。長時間儲存在2-8℃時，血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。因此，推薦在-20℃以下儲存血清，并避免反復凍融。我們建議血清應(yīng)保存在-2O℃。若存放于4℃時，請勿超過一個月。若一次無法用完一瓶，建議無菌分裝血清至恰當?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。2、血清中包含絮狀...
Caspase-3 活性檢測原理
2025-08-04 Caspase-3是凋亡過程中最主要的終末剪切酶，因而也是研究最多的caspase，它激活pro-caspase-2,6,7,9等，特異水解多種凋亡關(guān)鍵蛋白如PARP，介導細胞核染色質(zhì)固縮、凋亡小體生成、核DNA斷裂。試劑盒測定原理基于Caspase-3特異水解多肽底物acetyl-Asp-Glu-Val-Aspp-nitroanilide(Ac-DEVD-pNA)，釋放硝基苯胺pNA。游離硝基苯胺pNA呈黃色在405nm具有最大吸收峰，用普通可見光分光光度比色方法測定。根據(jù)...
微生物培養(yǎng)基使用注意事項（二）
2025-08-01 問12:培養(yǎng)基PH值為什么不在標準范圍內(nèi)？答12:其實出現(xiàn)這個情況的問題有很多種,大致分為這么6大點:A、質(zhì)量不好(生產(chǎn)廠家出廠時PH就不正確)B、滅菌問題(高壓滅菌溫度過高或滅菌時間過長,導致葡萄糖類焦化從而PH降低)C、保存時間(超過保質(zhì)期或結(jié)塊)D、水質(zhì)出現(xiàn)問題(可以用去離子水、純化水、蒸餾水不能用礦泉水、自來水)E、保存溫度(保存溫度過高)F、光線直射以上6點都可能導致培養(yǎng)基PH出現(xiàn)偏差,如果出現(xiàn)此類問題,建議逐一排查,直到問題解決問13:培養(yǎng)基高壓滅菌時為什么會焦化...
微生物培養(yǎng)基使用注意事項（一）
2025-08-01 問01:微生物培養(yǎng)基是否有說明書？答01:微生物培養(yǎng)基一般是沒有說明書的，培養(yǎng)基中組分和使用說明都在瓶子的標簽上。問02:微生物培養(yǎng)基的貨號是什么？答02:微生物培養(yǎng)的貨號大部分都是以LA開頭的。問03:微生物培養(yǎng)基是否可以定制？答03:微生物培養(yǎng)基的制作工藝流程比較復雜，所有目前還定制不了客戶所需要的培養(yǎng)基。問04:培養(yǎng)基pH的初步調(diào)正。答04:因培養(yǎng)基在加熱消毒過程中、pH會有所變化，培養(yǎng)基各成分充分溶解后，應(yīng)進行pH的初步調(diào)正。例如，牛肉浸液約可降低pH=0.2，而腸浸...
科研人緊急集合！靶蛋白捉迷藏游戲，該結(jié)束了！
2025-08-01 還在為傳統(tǒng)pulldown技術(shù)的非特異性結(jié)合抓狂？實驗數(shù)據(jù)總被干擾，關(guān)鍵靶蛋白玩“失蹤”？Don'tworry！救星來了~索萊寶小分子Pull-down試劑盒攜黑科技登場，直接開啟科研“開掛”模式！什么操作？一圖看懂技術(shù)魔法！1.備好生物素化誘餌分子：小分子化合物、多肽、蛋白、DNA、RNA統(tǒng)統(tǒng)可以；2.混入樣本和反應(yīng)體系，搖身一變！原本“松松垮垮”的誘餌與靶蛋白結(jié)合，直接升級成鏈霉親和素與靶蛋白的“共價鐵CP”，最后用生物素瓊脂糖一抓一個準；3.質(zhì)譜鑒定直接“破案”靶蛋白身...

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