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索萊寶：細胞爬片制備詳細過程
2025-09-01 【爬片的準備】1.爬片可用一般的蓋玻片，也可用專用爬片；2.應用蓋玻片，可根據(jù)自己的需要剪裁成合適的大小，以備置于6孔板、12孔板或24孔板；裁剪時可用前護士輸液用于打開玻璃安瓶的小沙輪，或者是口腔科的那種小沙輪，輕輕劃一下后，稍用力一掰就分開了。如果接種大皿的話，我一般不將蓋玻片切開，直接清潔后放入培養(yǎng)皿中，到染色時再將之切開，這樣既保證了細胞均一性，又可同時做幾個指標的染色。3.將剪裁好的爬片，置于濃硫酸中浸泡并過夜，第二天先用自來水沖洗20遍，再置于無水酒清中浸泡6小時...
常用細胞固定液及優(yōu)缺點比較
2025-09-01 細胞固定液作用是殺死細胞，固定細胞形態(tài)。下面列舉幾種常用細胞固定液及優(yōu)缺點比較。1.冷丙酮可用于一般的免疫組化染色。將純的丙酮預先放入冰箱-20℃后便為冷丙酮（放心，丙酮在此溫度不會為固體的）細胞爬片取出后，PBS洗2遍，便可加入冷丙酮于-20℃（丙酮有很強的揮發(fā)性，注意將含有丙酮和爬片的器皿蓋嚴，防止其揮發(fā)）固定10分鐘。取出后，室溫吹干，然后放入-20℃保存。2.多聚甲醛(常用4%)：可用于免疫電鏡；也可用于免疫熒光以及TUNEL染色。主要檢測組織內(nèi)一些性能嬌弱的抗原特別...
cck8實驗步驟及注意事項
2025-09-01 CellCountingKit-8簡稱CCK-8試劑盒，為MTT法的替代方法，是一種基于WST（水溶性四唑鹽，化學名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽）的廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。可用于藥物篩選、細胞增殖測定、細胞毒性測定、腫瘤藥敏等試驗。下面介紹一下索萊寶cck8實驗步驟及注意事項。一.制作標準曲線（測定細胞具體數(shù)量）1、先用細胞計數(shù)板計數(shù)所制備的細胞懸液中的細胞數(shù)量，然后接種細胞到培...
細胞爬片的制備
2025-08-28 細胞爬片又名爬片。細胞爬片就是讓玻片浸在細胞培養(yǎng)基內(nèi)，細胞在玻片上生長，主要用于組織學，冰凍切片，細胞涂片，免疫組織化學，原位雜交等。下面給大家簡單介紹細胞爬片的制備。1.爬片可用一般的蓋玻片，也可用專用爬片；2.應用蓋玻片，可根據(jù)自己的需要剪裁成合適的大小，以備置于6孔板、12孔板或24孔板；裁剪時可用前護士輸液用于打開玻璃安瓶的小沙輪，或者是口腔科的那種小沙輪，輕輕劃一下后，稍用力一掰就分開了。如果接種大皿的話，我一般不將蓋玻片切開，直接清潔后放入培養(yǎng)皿中，到染色時再將之...
細胞復蘇的操作步驟及注意事項
2025-08-28 平時研究用的細胞，有需要冷凍保存。冷凍的過程稱為凍存，把凍上的細胞化開的過程叫細胞復蘇。細胞復蘇是一簡單的試驗操作，但操作中有許多需要注意的事項，在實驗操作中注意細小問題，才能使復蘇后的細胞狀態(tài)保持良好。細胞復蘇實驗準備：主要器材：一次性滴管、打火機、酒精燈、大鑷子、中鑷子、記號筆、廢液缸、封口膜、剪子。主要試劑：PBS、培養(yǎng)液、消化酶（胰酶）、75%酒精、雙抗。PBS配制：NaCL:4gKCL:0.1gNa2HPO4:1.745gKH2PO4:0.1g三蒸水：500mL，溶...
細胞凍存與復蘇操作步驟與注意事項文檔
2025-08-28 細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來，這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞，可以防止因正在培養(yǎng)的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種，起到了細胞保種的作用。一、原理在不加任何條件下直接凍存細胞時，細胞內(nèi)和外環(huán)境中的水都會形成冰晶，能導致細胞內(nèi)發(fā)生機械損傷、電解質(zhì)升高、滲透壓改變、脫水、PH改變、蛋白變性等，能引起細胞死亡。如向培養(yǎng)液加入保護劑，可使冰點降低。...
關于CCK8實驗步驟的敘述
2025-08-28 CCK-8為細胞增殖檢測試劑盒，細胞增殖是生物體的重要生命特征，細胞以分裂的方式進行增殖。必須強調(diào)指出，通過細胞分裂，可以將復制的遺傳物質(zhì)，平均地分配到兩個子細胞中去?？梢?，細胞增殖是生物體生長、發(fā)育、繁殖和遺傳的基礎。CCK8實驗步驟如下。CCK-8實驗步驟1、在96孔板中配置100μl的細胞懸液。將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱預培養(yǎng)24小時（37℃，5%CO2）。2、向培養(yǎng)板加入10μl不同濃度的待測物質(zhì)。3、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱孵育一段適當?shù)臅r間（例如：6、12、24或48小時）。4、向...
MTT法檢測細胞活性步驟及原理
2025-08-26 要知道MTT法檢測細胞活性步驟首先要知道MTT是什么？MTTMTT是一種粉末狀化學試劑，全稱為3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide，漢語化學名為3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴鹽，商品名：噻唑藍。是一種黃顏色的染料。MTT法檢測細胞活性原理檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結(jié)晶甲瓚（Formazan）并沉積在細胞中，而死細胞無...

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